化合物LH-17对谷氨酸导致原代皮层神经元凋亡的保护作用

研究化合物LH-17对谷氨酸诱导原代皮层神经元凋亡的保护作用及其机制。L-谷氨酸钠(0.1,0.5和1.0 mmol·L-1)处理神经元30 min进行造模,化合物处理组在加入L-谷氨酸钠前给予美金刚(1μmol·L-1)或不同剂量的LH-17(0.1,1和10μmol·L-1)预孵育1 h再造模;换正常神经元培养基继续培养24 h后,MTT法检测细胞存活率,流式细胞仪检查细胞凋亡和坏死率,琼脂糖电泳分析凋亡后DNA lad-der情况;Fura-2对细胞内钙进行染色,荧光显微镜观察LH-17瞬时给药后细胞内钙离子浓度的影响,试剂盒分析NO水平。结果表明,L-谷氨酸钠浓度依赖性地诱导神经元发生凋亡和坏死,LH-17能抑制L-谷氨酸钠对细胞的毒性作用,减少凋亡小体,降低DNA断裂程度;L-谷氨酸能引起细胞内钙浓度大幅增加,用LH-17预处理后,增加幅度明显降低(P<0.05);同时,LH-17逆转了L-谷氨酸导致的细胞内NO浓度增高。以上结果提示,LH-17可能通过抑制神经元内钙超载,及下游NO浓度增高而起到减少谷氨酸引起的兴奋性氨基酸毒性的作用。