糖基转移酶C3ORF39的亚细胞内定位及组织分布特征研究

目的 Notch分子是一个高度糖基化修饰的信号分子,但催化其O-葡聚糖中木糖转糖基反应的糖基转移酶至今未能明确。本研究旨在克隆表达人类糖基转移酶61家族中的C3orf39,初步明确其细胞内定为及部分组织分布特征。方法体外克隆表达C3ORF39重组蛋白,免疫新西兰兔制备该重组蛋白的多克隆抗体;采用免疫组织化学方法明确该基因编码的糖基转移酶在部分组织细胞中的分布特征。构建荧光重组蛋白编码质粒,转染HepG2细胞,利用激光共聚焦显微镜观察该糖基转移酶可能的亚细胞定位。结果制备的C3ORF39重组蛋白多克隆抗体具有较高的免疫活性和特异性。免疫组织化学分析显示,该糖基因主要表达与肝细胞、肠上皮细胞、肾小管上皮细胞和胃腺体上皮细胞;部分表达于淋巴结、脾脏、间质细胞。激光共聚焦观察显示,该糖基转移酶定位于内质网-Golgi体分泌途径上游。结论糖基因C3orf39定位于分泌途径中的内质网或cis-Golgi体部分,广泛表达与上皮组织和部分间质细胞。