花生AhFAD8基因的克隆、表达及活性分析

α-亚麻酸对促进人体健康具有重要作用,花生ω-3脂肪酸脱氢酶(FAD3、FAD7和FAD8)是催化亚油酸(18 2,LA)脱氢生成亚麻酸(18 3,ALA)的关键酶。研究利用电子克隆得到花生AhFAD8全长基因,采用RTPCR方法从花生未成熟种子中扩增出AhFAD8的全长cDNA,连接到毕赤酵母表达载体pPIC3.5K中,转化毕赤酵母GS115得到工程菌GS115-AhFAD8并进行诱导表达,采用气相色谱分析GS115-AhFAD8脂肪酸成分,结果表明,工程菌GS115-AhFAD8中亚油酸去饱和率由25.9%上升到32.5%,上升25.5%,说明在毕赤酵母中表达的花生AhFAD8蛋白具有一定脱氢酶活性。