猪流感病毒H1亚型HA蛋白特异性单克隆抗体的研制
Xi bao yu fen zi mian yi xue za zhi = Chinese journal of cellular and molecular immunology(2009)
摘要
目的:研制猪流感病毒抗H1亚型HA特异性单克隆抗体(mAb)。方法:构建H1亚型猪流感病毒A/Swine/Guangdong/LM/2004(H1N1)HA基因表达质粒,基因免疫6~8周龄雌性BALB/c小鼠,加强免疫后取其脾细胞与骨髓瘤细胞Sp2/0进行融合。通过ELISA、HI试验筛选阳性克隆。应用ELISA、HI试验和Western blot试验测定mAb的反应性和特异性。结果:共获得3株分泌抗H1亚型猪流感病毒HA蛋白的杂交瘤细胞株,分别命名为8C4、8C6、9D6。mAb腹水ELISA效价在1∶16000~1∶256000之间;HI效价为1∶512~1∶256000;对A/Swine/Guangdong/LM/2004的中和效价分别为:10-2.83、10-6.4、10-5.8。Westernblot分析结果显示,3株mAb只与H1亚型猪流感病毒HA蛋白反应。结论:HA蛋白特异性mAb的研制为H1抗原变异分析及H1亚型猪流感诊断方法的建立奠定了物质基础。
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关键词
hemagglutinin,gene immunization,swine influenza,monoclonal antibody
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