绿色荧光蛋白标记骨髓间质干细胞示踪技术在体外构建组织工程骨中的应用研究

探讨绿色荧光蛋白(hrGFP)标记技术在组织工程骨体外构建中对大鼠骨髓间质干细胞(rBMSCs)的示踪作用。用293FT细胞包装含hrGFP基因的慢病毒载体,收集病毒液转染rBMSCs,转染后细胞持续表达绿色荧光,流式细胞仪检测转染率81.3%。将hrGFP标记的rBMSCs与生物玻璃-胶原蛋白-透明质酸-磷酸丝氨酸支架复合培养体外构建组织工程骨。荧光显微镜下观察到绿色荧光的细胞在支架表面很好地黏附、增殖。成骨诱导后,表达绿色荧光的细胞内部及支架表面均有COLⅠ的阳性表达。说明HrGFP标记技术能直观有效地观察组织工程骨体外构建过程中细胞的黏附、生长及成骨分化等行为。