抗人胃癌相关蛋白GCRG224多克隆抗体的制备、鉴定及初步应用

目的:制备胃癌相关蛋白GCRG224的多克隆抗体。方法:在大肠杆菌中表达Thioredoxin/GCRG224融合蛋白,并以所获蛋白免疫新西兰白兔,制备抗GCRG224的多克隆抗体。ELISA、Westernblot法鉴定抗体的效价及特异性。免疫组化染色观察GCRG224在胃癌和正常组织中的表达。结果:在大肠杆菌中高效表达出相对分子质量(Mr)约为16800的Thioredoxin/GCRG224融合蛋白,经凝胶回收法得到纯度近100%的蛋白产品。制备了抗GCRG224多克隆抗体。ELISA法检测抗体的效价达到1:256000,Westernblot证实该抗体可与原核表达的GCRG224蛋白特异性结合。免疫组化染色显示GCRG224在胃癌组织中的表达明显强于正常胃黏膜组织。结论:GCRG224多克隆抗体的成功制备,为进一步深入研究GCRG224的生物学功能及其在胃癌发生发展中的作用奠定了基础。