痘苗病毒转移载体pSC65-HPV18 E6、E7的构建及鉴定

目的构建及鉴定含有人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)18型E6、E7基因的痘苗病毒转移载体pSC65-HPV18 E6、E7。方法以HPV18型全基因质粒为模板,PCR扩增HPV18 E6、E7基因,克隆到痘苗病毒转移载体pSC65中,获得重组转移载体pSC65-HPV18 E6、E7。重组转移载体转化大肠杆菌,挑取孤立菌落PCR初步筛选。选择阳性菌落提取质粒,酶切及测序鉴定。结果阳性菌落质粒酶切结果显示有340bp、500bp大小的目的基因片段,表明为重组转移载体。测序结果证实重组转移载体包含HPV18 E6、E7基因。结论成功构建包含HPV18 E6、E7基因的痘苗病毒转移载体pSC65-HPV18 E6、E7,研究结果为进一步构建包含HPV18 E6、E7基因的重组痘苗病毒奠定基础。