星状病毒70 mer探针寡核苷酸芯片制备及杂交条件的优化

目的 探讨有利于制备多种病毒长探针平行检测芯片的最佳制备及杂交条件.方法 通过引物直接标记方法,对70 mer探针寡核苷酸芯片的点样浓度、点样后固定方案、杂交温度、杂交时间进行优化.结果 70 mer寡核苷酸探针点样浓度在10 μmol/L时就可获得较高的的荧光强度,探针点样干燥后在3 600 mJ条件下紫外交联固定效果最好,在65 ℃条件下杂交8 h能获得最优杂交结果,所用杂交液是5×SSC(0.5%SDS、50 %甲酰胺、1%鲑鱼精DNA).结论 本实验优化了70 mer探针寡核苷酸芯片制备及杂交条件;此为进一步研制多种海洋环境人致病性病毒检测芯片奠定了基础.