华支睾吸虫乳酸脱氢酶(CsLDH)亚细胞及虫体组织定位

目的 真核表达华支睾吸虫乳酸脱氢酶基因并研究CsLDH的亚细胞及虫体组织定位.方法 构建pEGFP-N1-CsLDH真核表达质粒,转染HeLa细胞,通过绿色荧光蛋白标签GFP的示踪来揭示CsLDH在HeLa细胞中的亚细胞定位;免疫组织化学方法进行CsLDH的虫体组织定位.结果 双酶切和测序均表明真核表达重组质粒pEGFP-N1-CsLDH 构建成功,经RT-PCR鉴定转染正确的HeLa细胞能稳定表达,部分HeLa细胞的细胞膜出现强烈的绿色荧光;免疫组织化学的结果显示CsLDH主要定位成虫的表膜,口、腹吸盘,咽及肠支处.结论 华支睾吸虫乳酸脱氢酶为定位于虫体皮层和消化道界面的膜蛋白.