胞壁酰二肽对烟曲霉孢子刺激A549细胞分泌细胞因子的影响及其可能机制

目的:研究胞壁酰二肽(muramyl dipeptide,MDP)对烟曲霉孢子刺激人肺腺癌细胞株A549分泌细胞因子的影响及其可能机制。方法:应用透射电镜观察A549细胞吞噬烟曲霉孢子;采用实时聚合酶链反应(real-time polymerase chain reac-tion,Real-time PCR)检测MDP对烟曲霉孢子刺激A549细胞分泌肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)的影响;Real-time PCR检测烟曲霉孢子刺激A549细胞后核苷酸结合寡聚化结构域蛋白2(nucleotide-binding oligomerization do-main protein 2,NOD2)mRNA的表达;采用免疫荧光法检测烟曲霉孢子刺激A549细胞后NOD2蛋白的表达。结果:与灭活的烟曲霉孢子共孵育10 h后,A549细胞内可见吞噬的烟曲霉孢子;MDP联合烟曲霉孢子刺激显著增加了A549细胞中TNF-αmRNA的表达(P<0.05);A549细胞吞噬烟曲霉孢子24 h时细胞NOD2 mRNA表达较0h显著增加(P<0.05),48h时NOD2 mRNA表达较24 h时减少,差异有统计学意义(P<0.05);A549细胞吞噬烟曲霉孢子后24 h细胞内NOD2蛋白表达增加。结论:A549细胞能够吞噬烟曲霉孢子,MDP刺激可显著增加吞噬烟曲霉孢子的A549细胞分泌TNF-α,其作用可能是通过NOD2对烟曲霉孢子的识别来实现的。