猪瘟病毒石门株E2蛋白在杆状病毒系统中的表达

Xiang-yang ZHOU,Jing WAN,Xun LIAO,Zhu-jun ZHU,Xiao-wei CHEN,Fei-fen LIU,Wei-huan FANG

Progress in Veterinary Medicine（2012）

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摘要

以杆状病毒Bac-to-Bac表达系统表达猪瘟病毒(CSFV)石门株的E2蛋白,将CSFV石门株的E2囊膜糖蛋白基因亚克隆到杆状病毒转移载体pFastBacHTA中,获得重组转移质粒pFastBacHTA-E2.转化大肠埃希菌DH10Bac感受态细胞,获得重组Bacmid质粒后转染Sf9昆虫细胞,获得重组病毒.传毒3代后对表达蛋白进行Western blot和间接免疫荧光试验检测.结果显示,E2蛋白获得高效表达,能被抗E2蛋白的单克隆抗体2B10和6×His-单克隆抗体特异性识别,表明CSFV石门株E2囊膜糖蛋白在Sf9昆虫细胞中得到成功表达,具有良好的抗原反应性.

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关键词

Baculovirus expression system,E2 protein,Classical swine fever virus

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