DETECCIÓN DE Brucella abortus POR PCR EN MUESTRAS DE SANGRE Y LECHE DE VACUNOS

Objetivo. Evaluar el uso de la Reaccion en Cadena de la Polimerasa (PCR) para la deteccion de Brucella abortus en muestras de sangre y leche de vacunos. Materiales y metodos. Este estudio de tipo descriptivo fue realizado durante los anos 2004 y 2005. Se analizaron 136 animales de tres fincas localizadas en el municipio de Durania, Norte de Santander, Colombia. Se evaluo la presencia de anticuerpos en la leche mediante la prueba del anillo (PAL). Se amplifico el fragmento de 223pb del gen BCSP31. Se emplearon los cebadores B4 y B5 de la region interna de la secuencia del gen BCSP31 (GenBank, numero de M20404). Resultados. En aquellos animales positivos se obtuvo una muestra de sangre y leche para el analisis por PCR, la sangre no fue analizada por serologia. Se evaluaron diferentes metodos de extraccion de ADN. Se encontro que un 13.2% (18/136) de las muestras de leche fueron positivas a la PAL. Se analizaron 33 muestras de leche negativas por PAL de las cuales el 30.3% (10/33) resultaron positivas por PCR. Al analizar las muestras de sangre de los animales positivos por PAL el 94.1% (16/17) fueron positivas por PCR, mientras que el 47% (8/17) de las muestras de leche positivas por PAL, fueron positivas por PCR. Conclusiones. Se demostro la amplificacion de un fragmento de ADN de Brucella abortus en muestras de sangre y leche de vacunos. Los resultados preliminares demuestran que es posible usar PCR como prueba diagnostica de brucelosis en Colombia.