基孔肯雅病毒的实时荧光RT-PCR检测方法研究

目的:建立基孔肯雅病毒的荧光定量PCR检测方法。方法:人工合成基孔肯雅病毒部分有代表性的序列核酸作为阳性对照模板,设计几组实时荧光PCR引物、探针及反应体系,摸索出最佳反应体系条件。结果:建立的基孔肯雅病毒的实时荧光PCR检测方法最佳反应体系为:正向引物CH IK-FP终浓度500 nM,反向引物CHIK-RP终浓度1000 nM,探针CHIK-Probe终浓度250 nM;扩增程序为:50℃10 m in,95℃10 min,95℃10 s→62℃30 s 45次循环。结论:该方法灵敏度高、特异性强,适用于基孔肯雅病毒的快速检验。