口服含4-1BBL基因质粒疫苗菌对大鼠免疫功能的影响

利用减毒沙门氏菌为载体将4-1BBL体内转染抗原提呈细胞,观察体内4-1BBL基因转染对大鼠免疫功能的影响.构建含plRES2一EGFP-4-1BBL质粒的减毒沙门氏菌(疫苗菌),通过体外感染HepG2细胞观察疫苗菌的侵袭功能和携带外源基因能力,验证疫苗菌作为4-1BBL基因转染载体的作用.疫苗菌2周内连续灌服大鼠3次,末次灌服后14 d心脏取血处死,RT-PCR和荧光显微镜检测报告绿色荧光蛋白(GFP)在脾脏细胞中的转录表达,流式细胞仪检测外周血和脾脏中细胞表型变化.疫苗菌在体外能成功的将外源基因携带至HepG2细胞进行表达,灌服疫苗菌的大鼠外周血和脾脏细胞4-1BBL和4-1BB表达明显升高.外周血中CD3+、CD3+CD86+和CD3+CD256+,脾脏细胞中CD3+CD8+、CD3+CD25+也有明显的增高.表明含4-1BBL基因的减毒沙门氏疫苗菌能实现体内基因转染,4-1BBL的高表达能增强机体的细胞免疫功能.