甜荞麦16kDa过敏原基因的克隆及其原核表达载体的构建

目的 对甜荞麦(common buckwheat)过敏原的分子生物学开展研究.方法 通过RT-PCR克隆甜荞麦16 kDa过敏原蛋白的全长基因,并根据序列设计带有酶切位点的特异性引物,扩增甜荞麦16 kDa过敏原基因的完整开放阅读框,与pET-28a载体连接,构建原核表达载体.结果 本研究成功克隆了甜荞麦16 kDa过敏原蛋白的基因,且构建了其原核表达载体.该基因含有长度为450 bp的开放阅读框,编码149个氨基酸,在GenBank数据库中的登录号为EU883600,同源性分析发现其与数据库中已知的荞麦过敏原基因有高度的同源性.结论 本研究为甜荞麦16 kDa过敏原蛋白的重组表达和临床过敏性疾病的诊断奠定了基础.