流式荧光法检测抗MICB抗体的建立及初步应用

目的建立稳定、快速和特异的抗MHC-I类链相关基因B(MICB)抗体流式荧光检测方法,了解MICB抗体在健康人群中的分布频率。方法克隆、表达和分离纯化MICB融合蛋白,将其包被在Luminex微球表面,建立MICB抗体流式荧光检测方法。评价方法的线性范围、特异性、精密度、准确性,并用此方法检测500例健康人血清MICB抗体。结果 MICB抗体流式荧光检测方法在血清抗体浓度在3.1～100.0μg/mL之间,具有较好的线性关系,相关系数为0.995。回收实验和重复实验结果显示,其回收率为97.4%～99.6%,批内变异系数为3.4%、2.9%,批间变异系数为4.5%、4.9%。该检测方法与MICA抗体无交叉反应。500例健康人血清中发现4例MICB等位基因特异性抗体。结论 MICB抗体流式荧光检测方法的特异性和灵敏度较高,结果稳定可靠。MICB抗体在器官移植中的作用需进一步研究。