联合转染Survivin shRNA和CD44v3shRNA对结直肠癌SW480细胞增殖和侵袭能力的影响

目的:探讨联合转染Survivin短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)和CD44v3 shRNA对结直肠癌SW480细胞增殖和侵袭能力的影响.为结直肠癌的基因治疗提供实验依据.方法:设计并构建能够稳定转录shRNA并干扰Survivin和CD44v3分子表达的质粒,将其单独及联合转染结直肠癌SW480细胞后,分阴性对照组、空白质粒对照组,Survivin组、CD44v3组和共转染组.Western blot检测转染后Survivin和CD44v3蛋白表达的变化,流式细胞仪及MTT法检测细胞凋亡和细胞增殖的变化.Transwell小室检测细胞迁移能力的改变.结果:测序证明表达载体构建成功,共转染组Survivin和CD44v3的蛋白表达抑制率分别为84.2%±0.3%和77.3%±0.1%,与单独转染组相比差异有统计学意义(P<0.05).转染120 h后,共转染组、Survivin组和CD44v3组细胞生长抑制率分别为44.3%±0.1%、21.5%±0.2%、26.4%±0.2%,共转染组抑制效果最明显(P<0.05),总凋亡率分别为37.6%±2.3%、20.0%±0.4%、21.6%±1.6%.共转染组凋亡率最高(P<0.05),小室穿膜细胞数分别为66.12个±4.04个,89.35个±3.06个、93.53个±5.13个,共转染组与各组差异显著(P<0.05).结论:Survivin shRNA和CD44v3 shRNA可分别下调Survivin和CD44v3蛋白的表达,抑制结直肠癌细胞的增殖,促进其凋亡,减弱其迁移能力,而两者的联合转染能进一步抑制细胞的生长增殖,减弱细胞的侵袭能力.