Marc-145细胞CD151蛋白主要抗原表位区的表达及其与猪繁殖与呼吸综合征病毒感染关系的研究

为研究CD151与猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染的关系,根据GenBank中已发表的CD151蛋白的基因序列设计并合成一对特异性引物,从Marc-145细胞中扩增出294bp的CD151基因片段并克隆入pGEX4T-3载体,转化入大肠杆菌用IPTG进行诱导表达,经SDS-PAGE和Western blot对表达产物进行鉴定。表达蛋白纯化后用于免疫小鼠制备抗CD151蛋白血清,用ELISA和IFA检测抗血清的效价及特异性。将抗CD151蛋白血清与Marc-145细胞孵育后再感染PRRSV,观察细胞CPE验证该血清对PRRSV的阻断效果。结果表明成功构建了pGEX4T-3-CD151,获得了相对分子质量为37ku的重组CD151蛋白。制备的抗血清特异性结合Marc-145细胞并有效阻断PRRSV感染Marc-145细胞。这些研究结果为进一步阐明CD151与PRRSV感染的关系提供一定的理论基础。