三叶青愈伤组织培养及其总黄酮含量的研究

目的:通过三叶青愈伤组织诱导、增殖、分化及其总黄酮含量测定,探讨用三叶青愈伤组织生产三叶青黄酮的可行性。方法:以无菌苗叶片、野生三叶青叶片和茎段为外植体,诱导形成愈伤组织;经不同培养基培养后,选取两种典型的愈伤组织、叶片和块根为材料,以乙醇为溶剂,超声波提取总黄酮,用NaNO2-Al(NO3)3显色,在500nm处用分光光度计测总黄酮含量。结果:三叶青愈伤组织的最佳诱导培养基为2/3MS+2.0mg/L6-BA+2.0mg/LNAA,最佳增殖培养基为MS+2.0mg/L6-BA+2.0mg/LNAA,最佳生根培养基为1/2MS+1.0mg/L6-BA+1.0mg/LNAA。三叶青总黄酮含量在块根中为31.135mg/g,在叶片中为12.830mg/g,在愈伤组织中高达18.047mg/g。结论:三叶青愈伤组织中总黄酮含量较高,用愈伤组织可大规模生产三叶青黄酮,满足医药市场的迫切需求。