荧光高效液相色谱法测定血清中总唾液酸含量的分析

【目的】探讨荧光高效液相色谱法测定血清中总唾液酸含量的最佳条件。【方法】按优化实验的原则,将人体血清分别用三氟乙酸、硫酸、盐酸80℃水解,酸化浓度分别为0.05、0.10、0.15、0.20mol/L,酸解时间分别为30、60、90、120min,经50℃避光衍生150min后进行色谱分析。【结果】用0.10mol/L TFA溶液80℃水解60min测定的唾液酸浓度最佳,唾液酸的最适宜浓度在0.625～80μmol/L范围内,其平均回收率为94.0%,精密度、稳定性、重复性试验的相对标准差分别为1.3%、1.1%和1.0%。Neu5Ac的最低检出限为0.02μmol/L,16～19岁健康青少年血清中唾液酸(Neu5Ac)含量的平均值为(2.12±0.15)mmol/L。【结论】荧光高效液相色谱法测定唾液酸简单、重复性好、灵敏度高,可广泛用于人体血清唾液酸含量测定。