促肝细胞生长素部分逆转巨噬细胞趋化因子和马兜铃酸Ⅰ诱导的人肾小管上皮细胞转分化

目的 观察促肝细胞生长素(hepatocyte growth-promoting factor,pHGF)对巨噬细胞趋化因子(monocyte chemotatic protein-1,MCP-1) 协同马兜铃酸Ⅰ(aristolochic acid Ⅰ,AAⅠ)诱导的人肾小管上皮细胞(HKC)凋亡及上皮细胞-间质细胞转分化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响.方法 体外培养的HKC随机分为:空白对照组、转分化模型组及不同浓度pHGF (0.15、1.5、15、150、1 500 ng/ml)处理组.转分化模型组采用MCP-1(0.1 μg/ml)协同AAⅠ(10 μg/ml)诱导HKC转分化模型;pHGF处理组采用不同浓度pHGF对转分化模型HKC进行处理;空白对照组常规培养.采用WST-8法和流式细胞术观察各组细胞增殖和凋亡情况;RT-PCR检测各组细胞α-SMA mRNA表达;免疫组化检测各组细胞α-SMA、TGF-β_1、FN蛋白的表达.结果 与空白对照组相比,转分化模型组、不同浓度pHGF处理组HKC细胞增殖抑制率,凋亡细胞所占比例,α-SMA mRNA表达均明显升高(P<0.01),提示转分化模型制备成功.与转分化模型组细胞相比,pHGF(150 ng/ml)处理组HKC增殖抑制率明显降低(P<0.01),各浓度pHGF处理组HKC凋亡细胞所占比例均明显降低(P<0.01),HKC细胞α-SMA mRNA表达下调(150 ng/ml pHGF处理组尤明显);α-SMA、TGF-β_1、FN蛋白表达下调.结论 pHGF(150 ng/ml)可部分逆转MCP-1协同AAⅠ诱导的HKC增殖抑制、凋亡和EMT.