重金属汞单克隆抗体的制备及鉴定

通过双功能螯合剂(异硫氰基-苯甲基-乙二胺四乙酸,ITCBE)使汞离子与载体蛋白(匙孔血蓝蛋白,KLH)偶联,获得了免疫抗原 KLH-ITCBE-Hg(Ⅱ)。以该抗原免疫BALB/C 小鼠,取免疫小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞融合,杂交瘤细胞用 ELISA 方法筛选及有限稀释法亚克隆化,获得了5株可稳定分泌抗汞单克隆抗体的杂交瘤细胞株(E/H_9、E/B_2、1/F_(11)、1/H_7和 B/B_(11))。杂交瘤细胞染色体数目在97-104之间,所分泌的抗体均为IgM、κ型,其中杂交瘤细胞株 E/H_9、1/F_(11)和 B/B_(11)细胞培养上清液效价分别达1:640、1:320、1:160,腹水效价分别达1:6400、1:3200、1:6400。B/B_(11)的亲和常数为2.981×10~8L/mol,特异性试验表明:B/B_(11)与其它金属离子的交叉反应率均小于2%,具有较高的特异性。高亲合力和高特异性的抗汞单克隆抗体在该研究中的成功制备,为建立农产品和环境中重金属汞的快速免疫检测方法奠定了基础。