原生质体融合构建直接利用淀粉产衣康酸菌株

采用衣康酸高产菌株栖土曲霉T-730的原生质体,与葡萄糖淀粉酶产生菌黑曲霉Ni-5k的原生质体进行融合处理。在以30%PEG6000为促融剂,30℃保温20min的融合条件下进行融合,所得异核体经诱导获得3株稳定的融合株(F3,F9,F11)。以生淀粉为唯一碳源,对F3,F9,F11的发酵性能测定表明,F3在发酵过程中积累葡萄糖淀粉酶和衣康酸;对F3进行发酵条件初步探讨的结果表明,以10%生淀粉为碳源,连续发酵6d,F3的衣康酸产酸率达40.9mg/mL,对供给淀粉的转化率为40.9%。