华支睾吸虫分泌蛋白基因(CsCrSP)的克隆和生物信息学分析

目的筛选cDNA文库识别华支睾吸虫新基因,克隆并构建重组表达载体。方法对华支睾吸虫cDNA文库进行筛选,通过BLASTn程序进行序列比对,识别华支睾吸虫新基因,并应用Motifscan,NCBIConservedDo-mainSearch等程序对其进行结构域及进化树分析。结果筛选出华支睾吸虫未知基因Pcs004f03序列,含689bp;应用VecterNTI分析,理论相对分子质量(Mr)为21000,完整的ORF含561bp,编码187aa。该基因有潜在的糖激化位点、3个N肉豆蔻酰化位点、3个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点、蛋白激酶C磷酸化位点、cAMP-andcGMP依赖蛋白激酶磷酸化位点。利用软件在线搜索发现在第1～50aa内有一明显的信号肽,初步推断CsCrSP为一种分泌蛋白。结论CsCrSP基因为华支睾吸虫富含半胱氨酸分泌蛋白基因。