霍乱弧菌O139群新类型ig1-rstR-ig2结构和功能研究

目的研究霍乱弧菌(VC)O139群新类型ig1-rstR-ig2结构及功能。方法分别扩增CTXφ或nct-CTXφ基因组串联体的第一个基因组核心区末端和第二个基因组RS区起始端之间的基因,PCR产物测序及序列分析。扩增rstA的操纵区,克隆入pRS591质粒lacZ基因前,转化入JM109菌株,检测β-半乳糖苷酶活性,以反映rstA启动子强度。将不同类型rstR及启动子区分别克隆人pACYC184质粒,再将重组pACYC184质粒转化入携带不同重组pRS591质粒的JM109菌株中,检测β-半乳糖苷酶活性,以反映rstR表达产物RstR对rstA表达的影响。结果calc、ET和newO139类型ig1-rstR-ig2序列同源性分别为85.1%～91.6%、9.4%～17.7%和8.0%～26.2%。不同类型rstA的启动子强度不同,calc和ET类型的较高,newO139类型的较低。RstR对同类型rstA启动子活性表达均有明显的抑制作用,而对不同类型的则无明显抑制作用。结论阐明了霍乱弧菌(VC)O139群calc、ET和newO139类型ig1-rstR-ig2结构及功能。