犬细小病毒四川流行株分离鉴定及其遗传进化分析

从犬粪便中分离到1株细小病毒,在F81细胞出现明显的CPV病变,电镜观察可见细小病毒样粒子,进一步理化性质鉴定该病毒具有细小病毒的特征,表明所分离病毒为CPV,命名为CPV-04-08-CN-6。根据特异性引物,采用PCR技术扩增出VP2全长基因,将PCR产物克隆入pMDl8-T载体,进行测序分析。结果,CPV04-08-CN-6VP2基因全长1755bp,编码584个氨基酸,与CPV参照株的VP2基因核苷酸同源性为99.69%,12个核苷酸发生错义突变,导致4个氨基酸发生变异。VP2基因的系统发生分析表明CPV-04/08/CN-6在细小病毒分类上属于CPV-2a型。