鸭乙型肝炎病毒荧光定量PCR检测方法的建立及应用

本研究根据鸭乙型肝炎病毒(DHBV)基因组C基因序列设计一对特异性引物,建立一种快速检测DHBV的SYBR Green荧光定量PCR方法.该方法在7.8×102 copies/μL～7.8×108 copies/μL模板量时,呈现良好的线性关系,相关系数R2为0.999.利用该方法对来自山东不同地区的95份临床样品进行检测.结果显示,该方法特异性好,临床样品检测阳性率与常规PCR方法的符合率为97.9％,且灵敏度高于普通PCR约100倍.将该方法应用于DHBV感染雏鸭的动力学研究,结果表明,DHBV感染雏鸭11 d时病毒含量达到高峰,随后逐渐下降.该方法的建立不仅为临床提供一种对DHBV的快速准确的检测方法,也为药物有效评价时间点的选择提供了理论依据.