RIN1过表达对人胃癌细胞MKN28增殖的影响研究

[目的]研究RIN1过表达对人胃癌细胞MKN28增殖和细胞周期的影响.[方法]采用PCR法扩增人RIN1基因,并构建重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)-RIN1.采用脂质体转染法将pcDNA3.1(+)-RIN1及空载体pcDNA3.1(+)转染至人胃癌MKN28细胞,G418法筛选阳性克隆;Western blot法和免疫荧光法鉴定RIN1的高表达.CCK-8法和平板克隆实验检测RIN1高表达对MKN28细胞增殖的影响.流式细胞术检测RIN1高表达对MKN28细胞周期的影响.[结果]成功构建RIN1真核表达载体,RIN1基因全长为2 353bp.G418法筛选获得高表达RIN1的MKN28克隆细胞株MKN28/RIN1-1和MKN28/RIN1-2,Western blot结果显示这两株细胞分别为MKN28/3.1的3.21倍和3.17倍.过表达RIN1基因后,MKN28细胞增殖显著性加快,克隆数显著性增加;细胞周期改变,G0/G1期细胞减少而S期和G2/M期细胞增加.[结论]RIM基因过表达加速MKN28细胞从G1期向S期的转化促进细胞增殖;RIN1可能成为胃癌治疗的一个潜在靶点.